Preparación semiautomática de ácidos nucleicos para muestras de alimentos y piensos: simplicidad y conveniencia
La extracción de ácidos nucleicos es una parte vital de la PCR en tiempo real y, a menudo, es un desafío debido a varios factores, como la alta variabilidad de matrices de muestras y sustancias inhibidoras como ingredientes vegetales, alcoholes o sales.
La preparación de ácidos nucleicos puede implicar cuatro pasos principales:
- Lisis celular para romper células / tejidos
- Adsorción de ácidos nucleicos
- Lavado
- Elución
Los métodos manuales de preparación de ácidos nucleicos a menudo son laboriosos y requieren mucho tiempo y el resultado depende, entre otras cosas, de la naturaleza de la matriz de la muestra, así como de la experiencia del personal del laboratorio, por ejemplo.
Las soluciones de extracción automatizadas ayudan a simplificar y aumentar el rendimiento de la extracción de ácidos nucleicos. Una solución automatizada no solo reduce el tiempo de trabajo manual y los costos de mano de obra, sino que también aumenta la eficiencia y la calidad, y ayuda a estandarizar y armonizar los métodos internos. Sin embargo, para competir con la extracción manual, los sistemas automatizados también deben cumplir con otros requisitos, como resultados reproducibles, contaminación cruzada mínima y, por supuesto, facilidad de uso.
Use solo un kit de preparación para una amplia gama de aplicaciones: el nuevo SureFast® Mag PREP Food (F1060) está diseñado para la extracción de ADN animal y vegetal de muestras de alimentos y piensos, así como ADN bacteriano de enriquecimientos de cultivos junto con TANBead Maelstrom ™ 8 Autostage (ZMAL8). La tecnología se basa en perlas magnéticas y se pueden procesar hasta ocho muestras por ejecución. Para la preparación de muestras de virus se recomienda el SureFast® Mag PREP Pathogens (F1062), que estará disponible próximamente.
Solo se deben realizar tres pasos cuando se utiliza la solución de reacción rápida de R-Biopharm para la preparación de ácidos nucleicos:
- Lisis: añadir reactivos a la muestra homogeneizada e incubar bajo agitación continua en un termobloque
- Transferir el sobrenadante del lisado a una placa de pocillos profundos precargada
- Inserte la placa en el TANBead M8 Autostage e inicie el proceso
En un estudio exhaustivo, realizado por Congen, se analizó una variedad de matrices de alimentos y piensos comparando métodos de extracción basados en perlas magnéticas y filtros giratorios. Los resultados mostraron variaciones de valores de 1-2 cp entre las muestras extraídas de manera diferente. Además, para algunas matrices, se observaron mejores resultados de PCR con el método de extracción basado en perlas magnéticas.
Puedes revisar el estudio en este enlace